1、先把二氧化碳減壓閥裝在鋼瓶上面，然后打開鋼瓶開關可以看見二氧化碳減壓閥右邊25mpa表的壓力了開始動了（開啟時要溫柔的打開，類似家中液化氣鋼瓶閥門打開）
2、裝好二氧化碳減壓閥后先不要接二氧化碳培養箱，因為剛開始用還不熟悉操作方法，假如減壓閥不好會出很大的壓力出來，容易把二氧化碳培養箱給沖壞，二氧化碳培養箱一般使用的壓力都不會很高，所以一定要先調好減壓閥出口的壓力后再連接二氧化碳培養箱。
3、二氧化碳減壓閥裝在鋼瓶上面后就可以用減壓閥調節出口壓力了，操作者使用手輪插入減壓閥正面凸出凹洞處輕輕往里調節即可，越往里調節二氧化碳減壓閥出口的壓力就越大。
先可以試試減壓閥出口壓力是否穩定（一般情況下二氧化碳培養箱需要的壓力在0.03-0.06mpa范圍內，也有用到0.1mpa，具體需看實際情況，二氧化碳氣體不屬于危險氣體，即便放出來一點也不會有危險的，其他氣體就要另當別論了），如果確定沒有問題就把手輪給松下來，調節手輪松下來后即使鋼瓶是開著的減壓閥的出口也是沒有壓力的，因為減壓閥如不調節出口是沒有壓力的，如沒有問題即可連接使用二氧化碳培養箱。假如減壓閥沒有調節卻有壓力出來證明該減壓閥有問題，不能使用，此時建議換貨或者換專業的二氧化碳減壓閥生產廠家了。
減壓閥的安全使用，使用減壓閥應按下述規則執行：
（1）氣瓶放氣或開啟減壓閥時動作必須緩慢。如果閥門開啟速度過快，減壓閥工作部分的氣體因受絕熱壓縮而溫度大大提高，這樣有可能使有機材料制成的零件如橡膠填料、橡膠薄膜纖維質襯墊著火燒壞，并可使減壓閥燒壞。另外，由于放氣過快產生的靜電火花以及減壓閥有油污等，也會引起著火燃燒燒壞減壓閥零件。
（2）減壓閥安裝前及開啟氣瓶閥時的注意事項：安裝減壓閥之前，要略打開氧氣瓶閥門，吹除污物，以防灰塵和水分帶入減壓閥。在開啟氣瓶閥時，瓶閥出氣口不得對準操作者或他人，以防高壓氣體突然沖出傷人。減壓閥出氣口與氣體橡膠管接頭處必須用退過火的鐵絲或卡箍擰緊；防止送氣后脫開發生危險。
（3）減壓閥裝卸及工作時的注意事項：裝卸減壓閥時必須注意防止管接頭絲扣滑牙，以免旋裝不牢而射出。在工作過程中必須注意觀察工作壓力表的壓力數值。停止工作時應先松開減壓閥的調壓螺釘，再關閉氧氣瓶閥，并把減壓閥內的氣體慢慢放盡，這樣，可以保護彈簧和減壓活門免受損壞。工作結束后，應從氣瓶上取下減壓閥，加以妥善保存。
（4）減壓閥必須定期校修，壓力表必須定期檢驗。這樣做是為了確保調壓的可靠性和壓力表讀數的準確性。在使用中如發現減壓閥有漏氣現象、壓力表針動作不靈等，應及時維修。 （5）減壓閥凍結的處理。減壓閥在使用過程中如發現凍結，用熱水或蒸汽解凍，絕不能用火焰或紅鐵烘烤。減壓閥加熱后，必須吹掉其中殘留的水分。
（6）減壓閥必須保持清潔。減壓閥上不得沾染油脂、污物，如有油脂，必須在擦拭干凈后才能使用。 （7）各種氣體的減壓閥及壓力表不得調換使用，如用于氧氣的減壓閥不能用于乙炔、石油氣等系統中。